Методы исследования
Исследования, которые показаны в первую очередь
биопсия кожи и окраска гематоксилин-эозином
.
Образцы кожи или слизистых оболочек должны включать целостные пласты эпидермиса, непосредственно примыкающие к волдырям или эрозиям. Биопсия эрозий может часто провоцировать ложно отрицательные результаты диагностики из-за отсутствия эпидермиса, необходимого для интерпретации.
Биоптат кожи помещается в раствор на основе формалина для рутинной обработки в лаборатории с целью гистопатологического исследования.
Биопсия может помочь обнаружить стандартные признаки пузырчатки, необходимые для диагностики, но при других типах пузырчатки (например, семейная доброкачественная пузырчатка, болезнь Дарье или транзиторный акантолитический дерматит) могут быть обнаружены лишь определенные гистологические признаки, характерные для классической картины поражения. Однако эти признаки являются клинически отчетливыми.
Результат
результаты гистопатологического исследования, позволяющие заподозрить пузырчатку: изменения в эпидермальных, дермальных и базальных клетках; при вульгарной пузырчатке (ВП) базальные клетки теряют связь с соседними кератиноцитами при сохранении адгезии базальной мембране, что придает им вид надгробных камней; при эксфолиативной пузырчатке (ЭП), наблюдаются поверхностные буллы с расщеплением непосредственно под роговым слоем, часто в гранулированном слое; при паранеопластической пузырчатке (ПНП) наблюдаются гистопатологические признаки, позволяющие заподозрить пузырчатку (наличие базальных клеток в форме надгробных камней), мультиформную эритему и плоский лишай
биопсия кожи, прямая иммунофлюоресценция
.
Данный метод является наиболее патогномоничным. Образцы кожи или слизистых оболочек должны включать целостные пласты эпидермиса, непосредственно примыкающие к волдырям или эрозиям. Если биоптат берется с области эрозии, в ходе диагностики можно получить ложно отрицательные результаты из-за отсутствия эпидермиса. Ложно отрицательные результаты также могут наблюдаться при низком титре аутоантител. При подозрении на пузырчатку и негативных результатах биопсии кожи, необходимо повторить процедуру биопсии или же направить образец сыворотки для непрямой иммунофлюоресценции, анализа ELISA или иммуноблоттинга.
Биоптат кожи должен быть помещен в раствор, не содержащий формалин. Наиболее часто используемой средой для транспортировки является среда Мишеля и Зевса. Образец замораживается, сегментируется и окрашивается в квалифицированной иммунодерматологической лаборатории.
ПНП часто демонстрирует иммунофлюоресцентный профиль, позволяющий заподозрить пузырчатку, буллезный пемфигоид, лишай или комбинацию данных патологий. Такие результаты наблюдаются при рутинной окраске гематоксилин-эозином. В редких случаях иммунореактивность при ПНП не наблюдается.
Результат
Вульгарная пузырчатка (ВП) и паранеопластическая пузырчатка (ПНП): окраска для IgG, C3 в зоне широкой линейной полосы поверхности эпидермальных кератиноцитов в области супрабазилярного эпидермиса (выше в слоях эпидермиса при эксфолиативной пузырчатке [ЭП])
Исследования, проведение которых нужно рассмотреть
непрямой иммунофлуоресцентный анализ сыворотки
.
Предпочтительным методом забора сыворотки крови является венепункция.
Исследование методом непрямой иммунофлюоресценции (IIF) предусматривает нанесение сыворотки пациента на субстрат. Наличие аутоантител, которые характерным образом окрашивают субстрат, с большой вероятностью указывает на диагноз пузырчатки.
Ложно отрицательные результаты можно получить при концентрации аутоантител ниже уровня определения.
У некоторых пациентов отмечаются доказательства наличия аутоантител, однако нет признаков активного заболевания. Таким образом, необходимо установить клиническую зависимость.
Результат
иммунофлюоресцентное окрашивание поверхности кератиноцитов на субстрате кожи человека, пищевода обезьяны, пищевода морской свинки или мочевого пузыря грызуна
ELISA сыворотки крови
.
можно использовать для выявления специфических аутоантител, особенно антител к десмоглеину 1 и 3.
Предпочтительным методом забора сыворотки крови является венепункция. Ложно отрицательные результаты можно получить при концентрации аутоантител ниже уровня определения.
ELISA анализ сыворотки крови может иметь специфическое значение, особенно при наличии ревматоидного фактора.
Положительный результат теста подтверждает заболевание. Однако, у некоторых пациентов отмечаются доказательства наличия аутоантител, но отсутствуют признаки активного заболевания. Таким образом необходимо установить клиническую зависимость.
Последующие исследования редко оказываются необходимыми.
Результат
результат положительный, основанный на анализе и стандартном лабораторном исследовании
эндоскопия верхних отделов пищеварительного тракта
.
Эндоскопия может помочь в определении степени поражения или в случаях сомнительного диагноза.
Диагностика эзофагита позволяет заподозрить диагноз пузырчатки. Однако у многих пациентов пузырчатка не характеризуется поражением пищевода.
Результат
эрозивный эзофагит и результаты биопсии указывают на наличие акантолитического процесса; вульгарная пузырчатка (ВП), паранеопластическая пузырчатка (ПНП), лихеноидный эзофагит
Рентгенография органов грудной клетки
.
У пациентов с паранеопластической пузырчаткой (ПНП) часто развиваются поражения легких.
Поражение легких при вульгарной (ВП) или эксфолиативной пузырчатке (ЭП) не наблюдается, однако данный симптом свидетельствует о ПНП.
Результат
результаты, указывающие на облитерирующий бронхиолит
КТ-сканирование грудной клетки
.
У пациентов с паранеопластической пузырчаткой (ПНП) часто развиваются поражения легких.
Поражение легких при вульгарной (ВП) или эксфолиативной пузырчатке (ЭП) не наблюдается, однако данный симптом свидетельствует о ПНП.
Результат
результаты, указывающие на облитерирующий бронхиолит
Исследование функции легких
.
У пациентов с ПНП часто развиваются поражения легких.
Поражение легких при вульгарной (ВП) или эксфолиативной пузырчатке (ЭП) не наблюдается, однако данный симптом свидетельствует о ПНП.
Результат
обструктивное нарушение дыхания из-за облитерирующего бронхиолита (паранеопластическая пузырчатка [ПНП])
иммуноблоттинг сыворотки крови (Вестерн-блот)
.
Предпочтительным является стандартный забор сыворотки крови. Ложно отрицательные результаты можно получить при концентрации аутоантител ниже уровня определения. Подгруппа пациентов с ПНП, но без идентифицированных антител.
Было предположено, что некоторые формы ПНП не имеют связанных аутоантител и поэтому являются «серонегативными».[33]
Положительный результат теста подтверждает заболевание. Однако, у некоторых пациентов отмечаются доказательства наличия аутоантител, но отсутствуют признаки активного заболевания. Таким образом необходимо установить клиническую зависимость.
Результат
антитела к компонентам десмосомы (при эксфолиативной пузырчатке [ЭП] и вульгарной пузырчатке [ВП]) и к гемидесмосомам (паранеопластическая пузырчатка [ПНП])
Использование этого контента попадает под действие нашего заявления об отказе от ответственности