Investigações

Primeiras investigações a serem solicitadas

Hemograma completo

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Leucopenia com linfopenia absoluta e relativa são comuns durante a primeira semana da doença; geralmente, estão associadas à trombocitopenia.

São observadas linfocitoses absolutas e relativas acentuadas de rebote durante a segunda semana da doença.[68]

A leucopenia ou a trombocitopenia estão presentes em até dois terços dos pacientes no momento da apresentação.

Contagens normais não descartam o diagnóstico.

Anemia é menos frequente.

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leucopenia; trombocitopenia

TFHs

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Geralmente mostram transaminases leve ou moderadamente elevadas.

Geralmente, a bilirrubina e a fosfatase alcalina estão dentro dos limites normais, a menos que o paciente já esteja em condições críticas (por exemplo, choque séptico).

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elevado

esfregaço de sangue periférico

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Recomenda-se uma avaliação cuidadosa do esfregaço de sangue periférico a fim de se detectarem mórulas citoplasmáticas (inclusões de Ehrlichia/Anaplasma) nos leucócitos.[Figure caption and citation for the preceding image starts]: Esfregaço de sangue periférico mostrando mórulas intracitoplásmicas (seta) de Anaplasma phagocytophilum em um neutrófilo polimorfonuclear (coloração de Giemsa, 1000x)Cortesia de J. Stephen Dumler, MD [Citation ends].com.bmj.content.model.Caption@3b4489c0

Embora seja uma investigação recomendada, a detecção de mórulas é considerada insensível como teste diagnóstico nos pacientes imunocompetentes. No entanto, na experiência clínica, em pacientes imunocomprometidos um exame de esfregaço de sangue periférico realizado por um hematologista experiente pode confirmar o diagnóstico com mais rapidez.[67]

Está presente em <10% dos casos de erliquiose monocitotrópica/monocítica humana (EMH) e em 25% a 75% dos casos de anaplasmose granulocitotrópica/granulocítica humana (AGH).[17][48][62][63][66][69][70][99]

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mórulas citoplasmáticas em leucócitos infectados

Investigações a serem consideradas

ensaio por imunofluorescência para detecção de anticorpos

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Diagnóstico para EMH e AGH.[71][76][77][101]

Deve-se obter amostras pareadas durante as fases aguda e convalescente (ou seja, 2-4 semanas depois) para demonstrar um aumento dos títulos de anticorpos. Um aumento de quatro vezes ou mais nos títulos de anticorpos é diagnóstico.[68]

A sensibilidade em amostras pareadas aproxima-se de 100%, com alguns falso-negativos documentados em pacientes que estavam recebendo tratamento com antibióticos muito precocemente com base em uma alta suspeita clínica ou em pacientes com síndrome de imunodeficiência adquirida (AIDS).

A especificidade varia bastante de acordo com o momento em que os testes são realizados e as reações sorológicas cruzadas entre as espécies de Ehrlichia e Anaplasma.

Não pode ser usada para o diagnóstico da erliquiose ewingii humana devido à extensa reatividade cruzada dos anticorpos com o E chaffeensis.

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anticorpos contra Ehrlichia chaffeensis ou Anaplasma phagocytophilum

reação em cadeia da polimerase

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Detecta ácidos nucleicos erliquiais (DNA/RNA) de espécimes de tecido/sangue periférico usando primers direcionados a um determinado gene erliquial.[4][48][73]​​[76][77]

Disponível somente em centros especializados (por exemplo, Centros de Controle e Prevenção de Doenças [CDCs], grandes laboratórios de referência e laboratórios de pesquisa acadêmica).

As amostras de sangue iniciais devem ser colhidas em um tubo de tampa vermelha para ensaios sorológicos basais e tubos contendo ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) ou citrato.

A sensibilidade e a especificidade dependem das condições da reação e do protocolo (por exemplo, primers de DNA), e se o tratamento foi administrado antes da coleta da amostra ser processada pela reação em cadeia da polimerase.

A reação em cadeia da polimerase usando primers específicos para E ewingii é o único método de diagnóstico disponível para a erliquiose ewingii humana; ​a E ewingii não é cultivável.[4][88]

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DNA/RNA de Ehrlichia ou Anaplasma

Novos exames

Western immunoblotting

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Útil para confirmar um ensaio de imunofluorescência ou diferenciar a infecção E chaffeensis da A phagocytophilum em áreas nas quais as 2 bactérias forem endêmicas (por exemplo, estados do centro Atlântico e do nordeste).[63][102]​​​[103][104]​​[105]​​[106]​​[107]​​[108][109]

A sensibilidade analítica é teoricamente superior à do ensaio de imunofluorescência, embora isso não tenha sido avaliado sistematicamente.

Disponível somente em laboratórios de pesquisa altamente especializados.

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anticorpos contra Ehrlichia chaffeensis ou Anaplasma phagocytophilum no soro

cultura

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Requer monocamadas celulares para isolamento, além de ser incômoda, demorada e cara. O crescimento leva vários dias a semanas.

Depende muito da inoculação rápida depois de obter uma amostra do paciente.

Isolado mais frequentemente em pacientes com vírus da imunodeficiência humana (HIV)/AIDS.

A amostra deve ser obtida na apresentação inicial antes do início do tratamento com antibióticos.

Disponível somente em laboratórios de pesquisa altamente especializados.

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Ehrlichia chaffeensis ou Anaplasma phagocytophilum isoladas da amostra de sangue

imuno-histoquímica

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Os anticorpos monoclonais ou policlonais usados para detecção do antígeno em seções teciduais são obtidos por meio de biópsia ou autópsia.[46][110][111]

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antígeno de Ehrlichia chaffeensis ou Anaplasma phagocytophilum

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